常见问题
冻干菌株使用时出现不生长或者数值偏低现象的原因?
回答:


  • a)   运输问题:冻干菌株在送达目的地后未及时-18℃以下保存,导致在常温或高温下暴露时间过长。
  • b)   操作问题:冻干菌株复溶后取样量错误;采用倾注法时培养基温度过高;冻干菌株复溶后未尽快使用,并且未在2-8℃冰箱保存24h内使用。
  • c)   培养基问题:部分国产培养基会导致铜绿假单胞菌、大肠杆菌等难以生长;采用选择性培养基进行培养。
  • d)   培养条件问题:培养时间不足;需氧菌(如铜绿假单胞菌)培养时采用了封口处理,或厌氧菌(如生孢梭菌)未进行厌氧处理;培养基紧贴培养箱壁。




微穹质控菌株的优势有哪些?
回答:

1、精确的已知菌株cfu数量,减少实验失败率,避免各类菌悬液稀释以及人员操作导致的失败。

2、同批次质控菌株的cfu数量稳定,缩小样本间差异

3、极大减少实验准备时间,易使用降成本,质控菌株的使用仅需要10s复溶以及人员有一定无菌操作能力及使用移液枪的能力即可,大大减少人员培训成本以及原材料使用费用。

4、无溯源问题,均可追溯至CMCC或ATCC菌种保藏中心。

5、菌量稳定,有效期长达两年


商业派生菌株与标准菌株有何区别?
回答:

从技术角度来讲,标准菌株都是从国家认可的机构或者国外菌种保藏机构购买得到的,为0代菌种的冻干粉,在使用前需要进行复苏、传代、鉴定和保藏等工作,并且在使用前需要提前一天进行活化,需要梯度稀释后对其进行计数定量。

而商业派生菌株则是由标准菌株派生出来的,通常为冻干形式,一般是2~5代菌种,它的特点是不需要进行活化、传代和保藏,即得即用,无需进行提前活化和梯度稀释,按照厂家提供的说明书操作即可得到所需数量的菌液,大大节省了微生物实验室工作人员的工作负担。

从文件管理方面来讲,使用标准菌株时,从标准菌株到标准储备菌株,再到工作菌株,这一系列的使用过程均应有相应的程序文件和记录,相关的人员一定要进行必要的培训,具备齐全的培训记录;而使用商业派生菌株则只需要由生产厂家提供质检报告和溯源性报告,保证其与标准菌株所有相关特性等效,同时保证其可溯源性。

除此之外,与商业派生菌株相比,标准菌株的使用过程中对于硬件设施及耗材的投入相对较大,成本也并不比商业派生菌株低。

在微生物检验领域,商业派生菌株的应用范围和标准菌株并无明显区别,可用于药检中的灵敏度试验、促生长试验、无菌检查、培养基适用性检查、控制菌检查等;食品检验的定量、定性对照、培养基质控等;化妆品微生物检验质量控制。

消毒和灭菌的区别?
回答:

    消毒和灭菌是两个概念。灭菌(Sterilization)、除菌(Disinfection)和消毒(Sanitization)这三个经常被误用的词必须加以区别。灭菌和除菌是绝对化的术语。灭菌是指杀灭或不活化所有生命形式;除菌则是破坏或不活化致病微生物的传染,但在应用于细菌孢子时不一定有效。灭菌法是对无菌制剂等的生产过程中的灭菌,常用的方法有:湿热灭菌法,可用无菌保证值SAL(Sterility Assurance Level)表示效果;干热灭菌法;除菌滤过法;辐射灭菌法;环氧乙烷灭菌法。而消毒可以说是减少微生物数量,使之达到安全或相对安全的水平,而与使用规定和使用目的相符合。抗微生物剂是一种用来抑制微生物繁殖或消灭微生物的试剂的总称,它包括:

    (1)消毒剂 能消除以细胞繁殖形态出现的微生物污染的化学试剂;

    (2)灭菌剂 杀灭在无生命环境内的所有微生物生命形态的化学试剂;

    (3)除菌剂 用来消灭在无生命物体上的病原体的抗菌剂;

    (4)杀菌剂 可按具体作用分类:杀细菌的称为杀细菌剂;杀霉菌的则称之为杀霉菌剂;杀病毒的则称为杀病毒剂;杀孢子的则称之为杀孢子剂;

    (5)抑菌剂 仅是抑制微生物生长的化学试剂。

    因此灭菌和消毒是不可互换的术语,消毒剂在定义上也并不意味着是灭菌剂。消毒是消灭采自繁殖形态的细胞的活微生物的污染,但它不保证灭菌。

菌种污染的原因有哪些?
回答:    在微生物检验的过程中,常会发生杂菌污染。因此,必须高度重视,规范操作,注意每个操作环节,尽可能不受污染。

    (1)培养基污染

    组成培养基的各种原料,本身不同程度地混有杂菌和杂菌孢子。如果消毒灭菌不彻底,培养5天左右,在培养基表面和内部就会同时发生杂菌。

    (2)操作污染

    在培养基已彻底灭菌的情况下,发现被转接的培养基表面(包括种块周围)出现杂菌污染时,说明接种室(箱)、用具、菌种瓶表面及操作人员的手和工作服等消毒处理得不好,或者违反了检验操作规程。

    (3)环境污染

    由于培养室消毒不彻底,或者生物安全柜高效泄漏,或者培养皿、培养瓶非无菌,常常造成培养后的杂菌污染。

    (4)菌种本身污染

    由于菌种本身不纯,污染上杂菌。当它们进行转接时,会造成污染。


常见的微生物保存方法有哪些?
回答:    常见微生物保存方法有斜面低温保存法、甘油管保存法、磁珠保存法、真空冷冻干燥法保存等。

政策法规
操作视频